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　　以下是關(guān)于小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明：

　　BS-2216   小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理

　　采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。預(yù)先包被sMHC-2捕獲抗體的微孔中依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體，經(jīng)溫育洗滌后，通過TMB顯色反應(yīng)測(cè)定吸光度(OD值)，顏色深淺與sMHC-2濃度呈正相關(guān)?。

　　二、試劑盒組成

　　微孔酶標(biāo)板?：預(yù)包被抗體(96孔或48孔配置)

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：濃度梯度溶液(通常0.3mL×6管)

　　檢測(cè)抗體-HRP?：辣根過氧化物酶標(biāo)記物(10mL/5mL)

　　洗滌緩沖液?：20×濃縮液需稀釋使用?

　　顯色液?：底物A/B各3-6mL?

　　終止液?：酸性溶液(6mL/3mL)?

　　三、樣本處理

　　血清?：血液離心1000-3000×g 10分鐘，避免溶血?;

　　血漿?：EDTA/肝素抗凝，離心后取上清?;

　　組織勻漿?：按1:9比例加PBS勻漿，3000×g離心10分鐘?;

　　保存?：分裝凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融?。

　　四、操作步驟

　　平衡?：取出板條室溫平衡20分鐘，剩余板條密封4℃保存?;

　　加樣?：

　　空白孔：不加樣

　　標(biāo)準(zhǔn)品孔：50μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品

　　樣本孔：50μL待測(cè)樣本?;

　　孵育?：加入HRP檢測(cè)抗體100μL，37℃孵育60分鐘?;

　　洗滌?：用洗滌液洗板5次，拍干?;

　　顯色?：每孔加底物A/B各50μL，37℃避光反應(yīng)15分鐘?;

　　終止?：加終止液50μL，15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值?。

　　五、注意事項(xiàng)

　　有效期?：未開封試劑盒通常6個(gè)月(2-8℃保存)?;

　　線性范圍?：需按說(shuō)明書標(biāo)曲濃度操作，超出范圍可能導(dǎo)致誤差?;

　　應(yīng)用限制?：僅限科研使用，不可用于臨床診斷?。

　　如需具體品牌試劑盒的完整說(shuō)明書，可參考廠商提供的詳細(xì)文檔(如本生BS-2216或天正信達(dá)TZXD-2216?)。