天堂网av手机在线播放,亚洲六月丁香六月婷婷花,亚洲国产精品一区二区成人片国内,处破女视频免费观看亚洲

服務熱線:
15502280048
技術支持

您現(xiàn)在的位置:首頁  >  技術文章  >  本生新聞:ELISA試劑盒細胞的裂解方法!

本生新聞:ELISA試劑盒細胞的裂解方法!
更新時間:2022-11-04瀏覽:1770次

  本生新聞:ELISA試劑盒細胞的裂解方法!

  細胞裂解是改變細胞通透性和活性的重要實驗方法。那么,到底要如何裂解細胞呢?不妨來看下本生生物的詳述:

  對于培養(yǎng)細胞樣品:

  1.融解ripa裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入pmsf,使pmsf的終濃度為1mm。

  2.對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用pbs、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后,細胞就會被裂解。

  對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。

  3.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的page、western和免疫沉淀等操作。

  裂解液用量說明:通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。

  對于組織樣品:

  1.把組織剪切成細小的碎片。

  2.融解ripa裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入pmsf,使pmsf的終濃度為1mm。

  3.按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。)

  4.用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

  5.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的page、western和免疫沉淀等操作。

  6.如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

  注:ripa裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會出現(xiàn)一小團透明膠狀物,屬正常現(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組dna等的復合物。在不檢測和基因組dna結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實驗;如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子,例如nf-kappab、p53等時,通常不必進行超聲處理,就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。

本生(天津)健康科技有限公司 版權(quán)所有    備案號:津ICP備19006588號-1

技術支持:化工儀器網(wǎng)    管理登陸    網(wǎng)站地圖

聯(lián)系電話:
18502669006

微信服務號

狠狠色综合网久久久久久| 人性短片30分钟| 综合自拍亚洲综合图区高清| 牛牛色婷婷在线视频播放| 中文字幕日韩精品中文区| 国产精品免费观看夜夜嗨| 日产日韩亚洲欧美综合在线 | 亚洲av鲁丝一区二区三区 | 久久久久久久高清av少妇| 私密按摩师bd在线观看| 成人免费无遮挡在线播放| 看av免费毛片手机播放| 欧美日韩久久精品一区二区| 午夜男女爽爽爽| 亚洲AV成人影视综合网| 亚洲日韩一区二区三区| 久久精品国产亚洲av三区| 欧美 日本 一区二区三区| 小伙子自慰自慰自慰出了积液| 午夜男女爽爽爽爽爽网站| 久久久性色精品全国免费| 清冷校草受灌满哭求饶bl| 医院人妻闷声隔着帘子被中出| 久久久噜噜噜久久精品直播| 肥嫩多毛的大荫户| 亚洲午夜福利18禁噜噜噜| 精品人妻一区二区三区四区| 妈妈的朋友在线观看| 暴力调教一区二区三区| 久久精品亚洲国产欧美91| 亚洲熟伦熟女五十路熟妇| 亚洲综合伊人a v伊人| 亚洲精品毛片久久久久久久| 美女视频在线观看免费观看| 午夜精品久久久内射近拍高清| 波多野吉衣aⅴ无码一区| 亚洲欧美综合精品久久成人| 国产av无码专区亚洲精品| 欧美午夜精品人妻久久久久| 欧美日韩人妻精品一区二区| 欧美午夜精品视频在线观看|